Hier ist eine aktuelle Arbeit, die ein Verunreinigungsproblem veranschaulicht, das, ich wette, keiner von uns erlebt hat! Sie beschreibt Prozessarbeiten an einem Antimykotikum, Efinaconazol, das jetzt als Generikum erhältlich ist. Die Autoren überprüften die Reinheit verschiedener Chargen des Endprodukts und bemerkten stets einen kleinen Peak, der unter LC-Bedingungen den gewünschten überlagerte. Sie schätzten ihn auf etwa 0,06% der Proben (er tauchte jedes Mal auf!) und eluierte etwas schneller als das eigentliche Medikament.
Dies musste natürlich verfolgt werden. Der Standard liegt im Allgemeinen bei 0,15% für eine bekannte Verunreinigung und 0,10% für unbekannte. Und dieser Peak kam diesem Grenzwert zu nahe. Chemische Mittel zur Verringerung seines Vorhandenseins (verschiedene Salztrennung, unterschiedliche pH-Waschungen einer Lösung des API usw.) änderten die Mengen überhaupt nicht. Es gab keine Veränderung der Mengen in Kristallen im Vergleich zur „Mutterlauge“ in Kristallisationsexperimenten, was ziemlich seltsam ist.
Analytisch schien die Verunreinigung ein Dalton schwerer als die Ausgangssubstanz zu sein, was ein echtes Rätsel ist. Weitere Massenspektrometrie-Arbeiten grenzten die Gewichtszunahme auf die Piperidinregion ein, aber es gab keine Hinweise darauf, dass das Piperidin-Ausgangsmaterial eine M+1-Verunreinigung aufwies. Dies alles deutet darauf hin, dass das Problem außerhalb der Ausgangsmaterialverunreinigungen und außerhalb der während des Syntheseprozesses eingeführten Verunreinigungen liegt.
Hochauflösende (Orbitrap) Massenspektrometrie-Daten zeigten, dass die Masse genau einem Deuterium entsprach, das gegen ein einzelnes H im Piperidinring ausgetauscht wurde. Eine groß angelegte HPLC-Reinigung von 100g Efinaconazol ergab 6mg „reine Verunreinigung“, und NMR-Spektren bestätigten die Deuteriumzuordnung. Die natürliche Häufigkeit von Deuterium beträgt 0,015%, und es gibt vier mögliche Substitutionen neben dem Stickstoff, was Ihre 0,06% Verunreinigung ergibt, die durch ihr sehr leicht unterschiedliches physikalisches Verhalten offenbart wird. Huch!
Quelle: Hacker News · Zusammengefasst von HeadlinesBriefing